Τόμος 2 (1984) – Τεύχος 2 – Άρθρο 1 – Επιθεώρηση Κλινικής Φαρμακολογίας και Φαρμακοκινητικής-Ελληνική Έκδοση – Volume 2 (1984) – Issue 2 – Article 1 – Epitheorese Klinikes Farmakologias και Farmakokinetikes-Greek Edition

Genetic Engineering: Tools and methods

^{Κέντρο Βιολογικών Ερευνών, Εθνικό Ίδρυμα Ερευνών}

G.J. Dimitriadis

2: 101-126 (1984)

PHARMAKON-Press: Drugs and Pregnancy, Epitheorese Klin. Farmakol. Farmakokinet. 2: 101-126 (1984)

Genetic Engineering

Σήμερα υπάρχουν τεχνικές που επιτρέπουν τη μεταφορά μέρους του γενετικού υλικού από ο­ποιοδήποτε κύτταρο ή οργανισμό σε ένα πλασμί­διο (εξωχρωμοσωμικό στοιχείο των βακτηρίων) ή σε έναν ιό και στη συνέχεια τον πολλαπλασια­σμό τους σ’ ένα βακτήριο. Έτσι, ξεπεράστηκαν οι συνηθισμένοι βιολογικοί φραγμοί μεταξύ των ειδών και δημιουργούνται νέοι γενετικοί συνδυα­σμοί. 0 γενετικός ανασυνδυασμός (ουσιαστικά δη­λαδή το σπάσιμο και η επανασϋνδεση των μορίων του DNA), που είναι ένας από τους βασικούς μηχανισμούς των ζωντανών οργανισμών, αποτε­λεί τον πυρήνα της γενετικής μηχανολογίας. ‘Ετσι λοιπόν η γενετική μηχανολογία ορίζεται ως η τεχνολογία για τη μεταφορά in vitro γονιδίων, ομά­δων γονιδίων ή μέρους γονιδίων από έναν οργα­νισμό σε έναν άλλο.

Ανάλογο με την πηγή του DNA και με τη φύση του κυττάρου-δέκτη όπου εισάγεται το DNA διακρίνονται τρεις γενικές κατηγορίες πειρα­μάτων. Η πρώτη κατηγορία περιλαμβάνει τη με­ταφορά DNA προκαρυωτικών οργανισμών στο γονιδίωμα άλλων προκαρυωτικών οργανισμών, όπως π.χ. την εισαγωγή DNA βακτηριοφάγου στο DNA βακτηριακού πλασμιδίου. Η δεύτερη, τη μεταφορά γονιδίων από ευκαρυωτικό οργανισμό στο γονιδίωμα προκαρυωτικού οργανισμού, όπως π.χ. την εισαγωγή γονιδίου θηλαστικών (παρά­δειγμα ινσουλίνης) σε βακτηρικό πλασμίδιο ή βακτηριοφάγο. Η τρίτη, την εισαγωγή ευκαρυωτι­κού DNA στο γονιδίωμα άλλου ευκαρυωτικού κυττάρου του ίδιου ή άλλου ευκαρυωτικού ορ­γανισμού.

Στο άρθρο αυτό γίνεται προσπάθεια να περι­γραφούν σφαιρικά τόσο οι τεχνικές, όσο και τα «εργαλεία» που χρησιμοποιεί η γενετική μηχανο­λογία.

1. Arber, W.; Restriction Εndοnυcleases. Angew. Chem. (int. Engl. 17: 73 (1978)
2. Dussoix, D., Arber, W.: Host specificity of DNA produced by Escherichia coli II. Control over acceptance of DNA from infecting phage λ. Mol. Biοl. 5: 37 (1962)
3. Nathans, D., Smith, H.O.: Restriction endonucleases. Rev. Biochem. 44: 273 (1975)
4. Roberts, R.J.: Restriction and modifation enzymes and their recognition sequences. Gene 4: 183 (1978)
5. Cohen, S.N., Chang, A.C.Y.: Recircularization and auto­nomus replication of a sheared R-factor DNA segment in Escherichia coli transformants. Natl. Acad. Sci. 70: 1293 (1973)
6. Clover, D.M.: Genetic Engineering – Cloning DNA. Chap­man and Hall, London, (1980)
7. Hershfield, V., Boyer, H.W., Yanofsky, C., Lovett, M.Α., Helinski, D.R.: Plasmid Col E1 as a molecular vehicle for cloning and amplification of DNA. Nat. Aced. Sci. 71: 3455 (1974)
8. Chang, A.C.Y., Cohen, S.N.: Genome construction bet­ween bacterial species in vitro: replication απd ex­pression of Staphylococcus Plasmid genes in Escherichia coli. Proc. Nat. Acad. Sci 71: 1030 (1974)
9. Bolivar, F., Rodriguez, R.L., Betlach, M.C., Boyer, Η.W.: Construction απd characterization of new cloning ve­hicles. I. Ampicillin resistant derivatives of the Plasmid pΜB9. Gene 2: 75 (1977)
10. Bolivar, F., Rodriguez, R.L., Greene, P.J., Betlach, M.V., Heynecker, Η.L., Boyer, H.W., Crosa, J.H., Falkow, S.: Construction απd characterization of new cloning ve­hicles. II. A multipurpose cloning system. Gene 2: 95 (1977)